سابقه و هدف: صلبیه و مشیمیه به عنوان لایه های خارجی و میانی چشم از مزانشیم اطراف جام بینایی منشا می گیرند که در تکامل آن سلول های ستیغ عصبی نقش ارزنده ای ایفا می کنند. بخش عمده ای از سیگنال های هدایت کننده روند تکامل در چشم، در واقع اجزایی از ماتریکس خارج سلولی و یا گلیکوکونژوگه های سطح سلول می باشند. هدف از این مطالعه شناسایی اجزا ماتریکس خارج سلولی و ترکیبات قندی سطح سلول به هنگام تکامل این لایه ها در چشم است.مواد و روش ها: جنین های روزهای یازدهم تا بیستم تولد و نوزادان یک تا پانزده روزه موش صحرایی(Rat)  جمع آوری شدند. مقاطع بریده شده توسط رنگ آمیزی های هیستوشیمی و تکنیک لکتین هیستوشیمی (PNA,BSA1-B4,S/PNA) مورد مطالعه قرار گرفتند و بر اساس شدت رنگ آمیزی درجه بندی شدند.یافته ها: آزمون آماریMann-Whitney ، اختلاف معنی داری را میان روزهای مورد مطالعه تنها برای ترکیبات قندی خنثی و گلیکوزآمینوگلیکان های اسیدی کربوکسیله نشان داد (p<0.05). به علاوه مزانشیم اطراف جام بینایی به شدت با لکتین BSA1-B4 واکنش نشان داد و بدین ترتیب حضور قند انتهایی D-Gal در سلول های مزانشیمی این ناحیه نشان داده شد. واکنش مزانشیم فوق به لکتینPNA  برای قند انتهایی D-Gal منفی بود اما پس از به کارگیری روش هضم آنزیمی سیالیداز، بعضی از سلول های مزانشیمی به این لکتین با شدت کم پاسخ دادند. بدین ترتیب وجود اسید سیالیک و قند انتهایی Gal/GalNac در این سلول ها نشان داده شد.استنتاج: به نظر می سد مجموعه تغییرات ماتریکس خارج سلولی و قندهای انتهایی سطح سلول، بخشی از وقایع مسوول کنترل روند ریخت زایی در جنین به هنگام تشکیل چشم می باشد.

جهت مشخص نمودن قندهای انتهایی زنجیره های گلیکوکونجوگیتهای سطح سلولهای کرومافینی در حال تکامل موجود در ناحیه مرکزی غدد فوق کلیوی جنینهای موش را مورد بررسی قرار دادیم. از جنین در روزهای 20-13 موشهای سوری نژاد Balb/c استفاده شد. پس از طی مراحل فیکس و پاساژ بافتی و برش به طریق Serial Section به ضخامت 5 میکرومتر، جهت مشاهده غدد فوق کلیوی و انتخاب مطلوب، برشها ابتدا توسط روش رنگ آمیزی هماتوکسیلین - ائوزین (H & E) رنگ شدند و سپس برشهای انتخابی با بکارگیری لکتین هیستوشیمی مورد بررسی میکروسکوپی قرار گرفتند. از بین لکتینهای استفاده شده، فقط لکتین Maclura Pomifera Agglutinin) MPA )در روزهای مختلف جنینی، با شدت و ضعف وابسته به سن نمونه سلولهای کرومافین ناحیه ی مرکزی غدد فوق کلیوی را مشخص کرد. بقیه لکتینها در هیچکدام از نمونه های جنینی، سلولهای کرومافین را مشخص نکردند. با توجه به اینکه تنها لکتین MPA در روزهای مختلف جنینی با سلولهای کرومافینی قسمت مرکزی غدد فوق کلیوی واکنش داده است و این لکتین به طور اختصاصی در سطح سلول به گیرنده Galactos-N-Acetyl Galactosamine) Gal-GalNAc )متصل میگردد، لذا به نظر میرسد که قند انتهایی Gal-GalNAc به عنوان گیرنده ی فاکتورهای القایی تکامل، عامل کلیدی در تکامل سلولهای کرومافین در ناحیه ی مرکزی غدد فوق کلیه باشد.

سابقه و هدف: سرطان کولون بعلت پیش آگهی بد، فراوانی شیوع و علایم غیر اختصاصی، یکی از دلایل اصلی مرگ و میر سرطانها محسوب می گردد و بدین دلیل توجه تعداد زیادی از محققین به آن معطوف شده است. مطالعات جدید تغییرات زیادی را در  قندهای انتهایی سطح سلول در روند نئوپلازی نشان داده است. اهمیت این ترکیبات در تشخیص به موقع ضایعات، تعیین پیش آگهی و رفتارهای بیولوژیک سلولهای سرطانی و انتخاب پروتکل درمانی مناسب برای بیماران مورد تاکید قرار گرفته است.  هدف از این مطالعه شناسائی قند انتهایی گالاکتوز/N – استیل گالاکتوز آمین در پولیپ و آدنوکارسینومای کولون بود.  موادو روش ها: تحقیق به روش توصیفی صورت گرفت. بدین منظور بلوک های پارافینی47 بیمار با تشخیص های فوق از بخش آسیب شناسی بیمارستان خاتم الانبیا زاهدان انتخاب شدند. پس از تأیید تشخیص قبلی، از بلوکهای مناسب مقاطعی به ضخامت 7-5 میکرومتر از 10 بیمار (5 نمونه خوش خیم و 5 نمونه بدخیم) تهیه گردید.  برش ها تحت رنگ آمیزی اختصاصی لکتینی PNA (با رقت 10 میکروگرم در میلی لیتر در بافر فسفات با غلظت یک دهم مولار و pH=6.8) و آلشین بلو در pH=2.5 قرار گرفت و گزارشات بافتی تهیه شد.  یافته ها: در پولیپ وجود قند انتهایی گالاکتوز/N – استیل گالاکتوز آمین را فقط در هسته و بخش فوق هسته ای سلولهای انتروسیتی کولون نشان داد.  در حالی که در سلولهای سرطانی این قند انتهایی عمدتا در سطوح لومینال سلولی و ترشحات درون تشکیلات تومورال مشاهده شد. شدت واکنش به لکتین در سلول های نئوپلاستیک به مراتب بیشتر از انتروسیت ها در پولیپ بود. بدین ترتیب حضور قند انتهایی گالاکتوز/N - استیل گالاکتوز آمین در سیتوپلاسم و هسته سلولهای انتروسیتی و غشای آپیکال سلولهای نئوپلاستیک در آدنوکارسینومای  نشان داده می شود.  نتیجه گیری و توصیه ها: به نظر می رسد در سیر تغییرات نئوپلاستیک نه تنها شدت واکنش به لکتین ها، بلکه محل واکنش نیز تغییر می کند.

مقدمه: در مورد ماهیت و ترکیب ترشحات مجاری آوران اطلاعات کمی در دست است .از آنجایی که اهمیت گلیکوکانجوگیت ها در تولید و تکامل اسپرم ها در مطالعات فراوانی مورد تایید قرار گرفته است، این بررسی با هدف شناسایی گلیکوکانجوگیت های موجود در اپی تلیوم مجاری آوران و تعیین الگوی توزیع آنها با روش لکتین هیستوشیمی انجام شد.روش کار: در این مطلعه توصیفی، نمونه بافت از 30 موش نر بالغ BALB/c تهیه و پس از فیکساسیون و طی مراحل معمول آزمایشگاهی، از بلوک های پارافینی به دست آمده مقاطع بافتی با ضخامت 5 میکرومتر آماده شد. لام ها با روش لکتین هیستوشیمی تحت تاثیر لکتین های مختلف قرار گرفتند. با استفاده از میکروسکپ نوری، شدت واکنش ها در سلول های مختلف و بر اساس مطالعات قبلی ارزیابی و رتبه بندی شد. یافته ها توسط آزمون آماری کراسکال - والیس و دان با یکدیگر مقایسه شدند.نتایج: میانگین شدت واکنش به لکتین های مختلف در اپی تلیوم مجاری آوران با یکدیگر تفاوت معنی دار آماری ((p<0.05 نشان داد. شدیدترین واکنش ها به لکتین WGA مشاهده شد و پس از آن به ترتیب در لکتین هایSBA ،  VVAوPNA  مشاهده گردید. در مورد لکتین GSA-I واکنشی مشاهده نشد.نتیجه گیری: نتایج به دست آمده نشان می دهند که سلول های اپی تلیوم مجرای آوران موش در ساخت و ترشح گلیکوکانجوگیت های مرتبط با بلوغ و تکامل اسپرمی دخالت داشته و انواع مختلفی از این ترکیبات را در مقادیر متفاوتی می سازند. قندهای اسید سیالیک، دی ساکارید گالاکتوز - ان استیل گالاکتوز آمین و منوساکارید ان استیل گالاکتوز امین به ترتیب فراوان ترین این ترکیبات بودند. عدم ردیابی گالاکتوز می تواند نشان دهنده عدم نقش آن در فرایند بلوغ اسپرمی باشد.

سابقه و هدف: تغییرات در زنجیره گلیکوکونجوگیت های سطح سلولی، در واکنش ها و تمایزات سلولی و دیگر پدیده های تکاملی اعضای جنینی تاثیرپذیری داشته و در این نوع قند انتهایی موجود در زنجیره های گلیوکونجوگیت ها، در تکامل جنینی نقش مهمی را ایفا می کند. هدف از بررسی حاضر مشخص نمودن نوع قندهای انتهایی موجود در این زنجیره ها طی روزهای مختلف تکاملی با کاربرد مواد لکتینی می باشد. مواد و روش ها: روش لیکتن هیستوشیمی با به کاربردن تعدادی از لیکتن های کونژوگه شده به وسیله HRP انجام گردید. در این رابطه تعداد 212 عدد از بافت های جنینی و نوزادی موش پس از فیکساسیون با محلولB4G و آماده سازی معمول بافتی با ضخامت 5 میکرومتر به صورت Serial selection تحت برش قرار گرفت. سپس جهتت مشخص نمودن نمونه های مطلوب با روش هماتوکسیلین و ائوزین رنگ شدند. یافته ها: واکنش سلول های ناحیه مرکزی غده فوق کلیوی جنین 16 روزه در برابر، لکتین OFA و لکتین های UEA1 و LTA به ترتیب، زیاد (+4) متوسط (+3) بود. این واکنش در سلول های نوزاد سه روزه در برابر، لکتین UEA1 و لکتین OFA و LTA به ترتیب کم (+2) و اندک (+) بود. سلول های جنینی و نوزادی در برابر لکتین های VVA و GSA1-B4 فاقد واکنش بودند. نتیجه گیری و توصیه ها: نتایج این بررسی نشان می دهد که در این روند یعنی، زمان واکنش پذیری با لکتین های (LTA) Lotus Tetragonolobus Agglutinin, (OFA) Orange Fungus, Agglutinin و (UEA1) Ulex Europeus Agglutinin1 پیشنهاد کننده این یافته می باشد که گلیکوکونجوگیت های دارای فوکوز در مسیر مهاجرتی سلول های نورال کرست به ناحیه مرکزی غدد فوق کلیوی و تبدیل آنها به سلول های کرومافینی، دارای نقش تعیین کننده می باشند.

سابقه و هدف: مطالعات نشان داده اند که تجویز مواد مخدر در حیوانات باعث اختلالات فراوانی در باروری و غدد ضمیمه تناسلی می گردد. از سوی دیگر در بررسی های انجام شده بر نقش حیاتی گلیکوکانجوگیت ها در بلوغ اپیدیدیمی اسپرم ها تاکید شده است؛ لذا این مطالعه با هدف پاسخ دادن به این سوال که آیا ممکن است تاثیرات نامطلوب مصرف مواد مخدر با ایجاد تغییرات در این گلیکوکانجوگیت ها که در بلوغ اسپرمی بسیار مهم هستند رخ دهد، انجام گردید. برای این منظور از لکتین ها استفاده شد که می توانند به طور اختصاصی قندهای انتهایی گلیکوکانجوگیت ها را شناسایی کنند.مواد و روش ها: 102 سر موش BALB/c مذکر و بالغ به سه گروه مساوی تقسیم شدند. به گروه تجربی سولفات مورفین و به گروه دیگر سرم فیزیولوژی تزریق شد. گروه سوم نیز بدون تغییر بررسی شد. وابستگی مزمن با تزریق زیر جلدی و به صورت سه بار در روز و به مدت 7 روز ایجاد شد (دوز دارو در روزهای 1 تا 7 به ترتیب: 10، 20، 40، 40، 80، 80 و 100 میلی گرم بر کیلو گرم بود). سپس اپیدیدیم ها در هر سه گروه خارج شدند و بعد از تثبیت و طی مراحل معمول آزمایشگاهی از بلوک های پارافینی تهیه شده مقاطع 5 میکرومتری به دست آمد. این مقاطع با استفاده از میکروسکوپ نوری بررسی شدند. شدت واکنش ها در سلول های مختلف، بر اساس مطالعات مرتبط قبلی رتبه بندی شد (نمره صفر برای عدم واکنش، 1 برای واکنش ضعیف، 2 برای واکنش متوسط و 3 برای واکنش قوی در نظر گرفته شد). سپس نتایج با استفاده از آزمون آماری کراسکال والیس و دان با یکدیگر مقایسه شدند.یافته ها: میانگین شدت واکنش به (WGA) Wheat Germ Agglutinin، اختصاصی برای قند اسیدسیالیک، بین گروه تجربی و گروه های شاهد و در کلیه سلول ها، تفاوت آماری معناداری نشان داد (P<0.05). در مورد سایر لکتین ها که برای ردیابی قندهای فوکوز، ان- استیل گالاکتوزآمین و دی ساکارید ان استیل گالاکتوزآمین- گالاکتوز به کار برده شدند، تفاوت معنادار آماری مشاهده نشد. نتیجه گیری: کاهش واکنش به WGA، نشان دهنده کاهش میزان اسیدسیالیک در نمونه های تیمارشده با مورفین است. با توجه به اهمیت اسیدسیالیک در حفاظت اسپرم ها و بلوغ اپیدیدیمی آن ها، می توان پیش بینی کرد که به دنبال این کاهش، فرآیند بلوغ اپیدیدیمی اسپرم ها دست خوش تغییرات نامطلوبی خواهد شد. تاثیر مورفین در محور هیپوتالاموسی ـ هیپوفیزی و ترشح هورمون های آزاد کننده گنادوتروپین ها، اثر مستقیم بر هیپوفیز و ترشح گنادوتروپین ها و یا تاثیر در عوامل تنظیم کننده موضعی می توانند از عوامل احتمالی بروز این تغییرات باشند.

سابقه و هدف: تجویز مورفین در حیوانات باعث اختلالات فراوانی در بیضه و باروری می گردد. از سوی دیگر نقش حیاتی گلیکوکانجوگیتها در اسپرماتوژنز نیز در بررسی های مختلف مورد تاکید قرار گرفته است. لکتینها ترکیباتی هستند که می توانند به طور اختصاصی قندهای انتهایی گلیکوکانجوگیتها را شناسایی کنند. لذا این مطالعه به منظور بررسی آثار احتمالی مورفین بر گلیکوکانجوگیتهای بیضه انجام شد.مواد و روشها: 102 سر موش نر BALB/c 2 تا 4 ماهه، در سه گروه مساوی بررسی شدند. به یک گروه سولفات مورفین و به گروه دیگر سرم فیزیولوژی تزریق شد و گروه سوم بدون تغییر مطالعه شد. پس از تهیه بلوکهای پارافینی از بیضه ها، مقاطع 5 میکرومتری به دست آمده با استفاده از لکتین هیستوشیمی تحت تاثیر لکتینهای مختلف قرار گرفتند. شدت واکنش در سلولهای اپیتلیوم منی ساز با استفاده از میکروسکپ نوری مطالعه و رتبه بندی گردید و سپس توسط آزمون آنالیز واریانس تجزیه و تحلیل انجام شد.یافته ها: میانگین شدت واکنش به لکتین Wheat Germ Agglutinin (WGA) که برای اسید سیالیک اختصاصی است، بین گروه تجربی و گروه های شاهد و در کلیه سلولها، تفاوت معنی دار نشان داد (P<0.05). در مورد سایر لکتینها که برای قندهای فوکوز، ان – استیل گالاکتوزآمین و دی ساکارید گالاکتوز – استیل گالاکتوزآمین اختصاصی هستند، تفاوت معنی دار آماری مشاهده نشد.نتیجه گیری: کاهش واکنش به WGA، نشان دهنده کاهش میزان اسید سیالیک در نمونه های مورفینی است. با توجه به اهمیت اسید سیالیک در اسپرماتوژنز، می توان پیش بینی کرد که به دنبال کاهش محتوای اسید سیالیک، فرآیند اسپرماتوژنز دستخوش تغییرات نامطلوبی شده و از میزان لقاح کاسته خواهد شد.

زمینه و هدف: ارگانیزرهای متفاوتی با ارسال پیام هایی باعث تکامل و تمایز نخاع می شوند. گلیکوکانجوگیت های مترشحه از سلول های دیواره جانبی نخاع نیز می تواند به عنوان پیام رسان های نوروژنزیس و تمایز عصبی باشد. این مطالعه به منظور تعیین نحوه گسترش ترکیبات قندی در دیواره های جانبی نخاع در دوران مورفوژنز موش BALB/c با استفاده از روش لکتین هیستوشیمی انجام شد.روش بررسی: در این مطالعه تجربی جنین های 10 تا 16 روزه در فرمالین فیکس شدند. سپس مقاطع میکروسکوپی از آنها تهیه گردید. نمونه های بافتی برای واکنش با گلیکوکانجوگیت ها در مجاورت لکتین های DBA، OFA، GSA1B4 و MPA قرار داده شدند. برای رنگ آمیزی زمینه از آلیسن بلو با pH=2.5 استفاده گردید.یافته ها: لکتین DBA هیچ واکنشی در ناحیه دیواره جانبی نخاع نشان نداد. لکتین MPA واکنشی نسبتا شدید ولی یکنواخت به خصوص در قسمت رشته های عصبی دیواره جانبی نخاع نشان داد. واکنش لکتین GSA1B4 در قسمت سلول ها و رشته های عصبی دیواره های جانبی نخاع خفیف بود، ولی این واکنش در عروق خونی به صورت شدید و واضح مشاهده شد. لکتین OFA با قند انتهایی -L-Fucose واکنشی شدید و مشخصی از همان اوایل دوران مورفوزنز در ناحیه دیواره های جانبی نخاع نشان داد.نتیجه گیری: بیشترین واکنش در قسمت دیواره های جانبی نخاع مربوط به OFA بود که نشان دهنده اهمیت قند انتهایی فوکوز با اتصال (1®6) به قند ما قبل آخر (Glc-Nac) N-acetyl-D-glocosamin در تکامل این ناحیه است. همچنین به دلیل واکنش شدید GSA1B4 با عروق خونی نخاع استفاده از این لکتین برای مطالعات عروقی توصیه می گردد.

انجام این مطالعه جهت شناسایی قند یا قندهای انتهایی شاخص در تکامل قسمت مرکزی غدد فوق کلیوی است. همچنین مشخص نمودن روزهای جنینی یا نوزادی که این قندها به عنوان فاکتور القایی در تکامل نقش دارند، هدف دیگر بررسی است.مواد و روش کاربرای بررسی از 12 سر موش ماده و 4 سر موش نر نژاد BALB/c استفاده شد. جنین ها در روزهای مختلف بارداری و نوزادان تا روز پانزدهم، بعد از فیکس شدن از آنها با روش های معمول بافت شناسی مقاطع در ناحیه غدد فوق کلیوی تهیه شد. تعداد جنین ها و نوزادان طبیعی بررسی شده 78 عدد بود. جهت شناسایی قندهای انتهایی از ردیابهای قندی شامل لکتینهای (Peanut agglutinin) PNA، VVA (Vicia villosa agglutinin)، (Grifonia simplciifolia-B4) GSA1-B4 استفاده شد. لکتین ها بعد از اتصال به قند انتهایی به وسیله رنگ (Diaminobenzidin) DAB شناسایی می شدند.نتایجدر روزهای مختلف جنینی از روز سیزدهم تا تولد و تا روز پانزدهم نوزادی، سلولهای بخش مرکزی غده فوق کلیوی فقط با لکتین PNA واکنش دادند. در آزمایش با لکتین های دیگر که از برشهای متعدد و در روزهای مختلف جنینی و نوزادی همانند آزمایش با PNA استفاده شد، هیچ واکنشی در بخش مرکزی غده فوق کلیه مشاهده نگردید.نتیجه گیرییافته های این مطالعه نشان داد که قند انتهایی Gal-GalNAc که ویژه لکتین PNA است، در روزهای تکاملی فوق ظهور می یابد. لذا پیشنهاد می شود که در دوران فوق قند مذکور نقش کلیدی را در تکامل ناحیه مرکزی غده فوق کلیوی به عهده دارد.

گلیکوکانژوگه ها یکی از مهمترین ترکیبات ماتریکس خارج سلولی هستند که نقش بر جسته ای در بیولوژی تکاملی دارند، لیمبوس مارپیتچی از اپیتلیوم حلزون گوش در کنار ارگان کورتی، تکامل می یابد. در طی تکامل این بخش، بسیاری از فرایندهای تکاملی نظیر مهاجرت سلولی، تکثیر سلولی و تغییر آرایش سلولی به چشم می خورد. با توجه به این موضوع به کمک روشهای هیستوشیمیایی و با کمک لکتینهای BSA1-B4 و PNA به ردیابی این گلیکوکانژوگه ها در طی تکامل لیمبوس از روز 12 جنینی تا روز 15 پس از تولد پرداخته شد.نتیجه این تحقیق، تغییرات گلیکوکانژوگه ها را در ماتریکس مزانشیم لیمبوس و در اپی تلیوم پوشاننده سطح آن نشان داد. در ضمن همزمان با بروز این ترکیبات، رشته های الاستیک در این بخش ظاهر شد.از نتایج حاصله چنین بر می آید که طرح تغییرات گلیکوکانژوگه های سطح سلول و ماتریکس خارج سلولی در روند تکامل لیمبوس از نظر فضایی زمانی تنظیم شده است.